高中生 自慰 BeyoMag™ Protei

发布日期：2024-08-29 10:05    点击次数：198

碧云天研发坐蓐的BeyoMag™ Protein A+G磁珠(BeyoMag™ Protein A+G Magnetic Beads)，也称Protein A+G免疫磁珠、Protein A+G免疫千里淀磁珠、SPA+G磁珠、卵白A+G磁珠、卵白A+G免疫磁珠或卵白A+G免疫千里淀磁珠高中生 自慰，是由高质料的重组Protein A、G与纳米级氨基磁珠共价偶联而成，可特异性地勾通相应抗体，主要用于免疫千里淀(Immunoprecipitation， IP)、免疫共千里淀(Co-IP)或染色质免疫千里淀(Chromatin Immunoprecipitation， Ch-IP)，也不错用于血清、细胞培养上清液或腹水等样品中抗体的纯化等。

Protein A是一种发现于金黄色 葡萄球菌(Staphylococcus  aureus)的细胞壁名义卵白，分子量为42kDa；Protein G是C型或G型链球菌(Streptococcal bacteria)抒发的免疫球卵白勾通卵白。Protein A和Protein G功能相通，能特异性地与哺乳动物免疫球卵白(Immunoglobulin， Ig)勾通，勾通的部位经常为免疫球卵白的Fc区，但有尊府泄漏Protein A也会和东说念主VH3眷属的Fab区勾通，而Protein G随机与Fab区也有一定勾通。同期，两者关于不同的免疫球卵白亚类的勾通智商有所不同。适合重组修订的Protein A 、G与磁珠以一定的口头勾通，可用于免疫千里淀或抗体的纯化。

Protein A+G磁珠妥当于免疫千里淀总共Protein A磁珠和Protein G磁珠单独不错免疫千里淀的抗体，包括human IgG1、IgG2、IgG3、IgG4，mouse IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3，rat IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG2c、rabbit、goat等多克隆抗体。下表是碧云天Protein A、Protein G、Protein A/G磁珠家具与东说念主、小鼠、大鼠常见的免疫球卵白亚类的勾通智商及不同物种的总勾通智商情况表。

Species Ig Protein A Protein G A+G Human IgG1 ++++ ++++ ++++ IgG2 ++++ ++++ ++++ IgG3 - ++++ ++++ IgG4 ++++ ++++ ++++ IgA ++ - ++ IgD ++ - ++ IgE ++ - ++ IgM ++ - ++ Mouse IgG1 + ++++ ++++ IgG2a ++++ ++++ ++++ IgG2b +++ +++ +++ IgG3 ++ +++ +++ IgM +/- - +/- Rat IgG1 - + + IgG2a - ++++ ++++ IgG2b - ++ ++ IgG2c + ++ ++ IgM +/- - +/- Total Ig Protein A Protein G A+G Human ++++ ++++ ++++ Mouse +++ +++ +++ Rat +/- ++ ++ Rabbit ++++ +++ ++++ Goat - ++ ++ Chicken - + + Cow ++ ++++ ++++ Guinea Pig ++++ ++ ++++ Hamster + ++ ++ Horse ++ ++++ ++++ Pig +++ +++ +++ Sheep +/- ++ ++      ++++， Strong Binding      ++~+++， Medium Binding      +， Weak Binding      +/-， Weak or No Binding      -， No Binding  

本族具中的重组Protein A和Protein G可与巨额哺乳动物IgG的Fc端特异性勾通，分子量均约为25kDa。该重组Protein A和Protein G通过修订，仅保留了与IgG Fc端勾通关连的氨基酸序列，去除了勾通位点除外可能导致非特异性勾通的序列，从而不错有用减少非特异性勾通。本族具的每个Protein A和Protein G分子分辩不错勾通5和3个IgG分子。

BeyoMag™ Protein A+G磁珠不错特异性地勾通相应抗体，并不错借助磁力架等磁分离建造相当方便地运用于抗体勾通的办法卵白或其卵白复合物的免疫千里淀或抗体纯化等本质。本族具进行免疫千里淀的本质进程参考图1。

图1.碧云天的BeyoMag™ Protein A+G磁珠免疫千里淀进程图。

本族具抗体勾通特异性强、抗体勾通量高：传统的Protein A+G琼脂糖凝胶孔径大，容易产生非特异吸附，而本族具磁珠粒径小，不易产生非特异吸附。本族具每毫升磁珠悬浊液含约10mg磁珠，由Protein A磁珠和Protein G磁珠按1:1比例夹杂而成，含有不少于0.6mg重组Protein A、G，经常可勾通不少于0.7mg东说念主IgG，具体的最大勾通量和抗体类型及办法卵白等关连。每500微升样品，经常仅需使用10-20微升磁珠悬浊液，就不错高效地进行免疫千里淀本质。

本族具勾通抗体或抗体复合物的速率快：本族具所使用的纳米级磁珠(~200nm)具有超大比名义积，便于磁珠与抗体或抗体复合物的快速有用勾通。经常10分钟内即可完成抗体或其复合物的吸附的过程，30分钟内完成办法卵白免疫千里淀操作。缩小操作时分不错有用幸免在永劫分操作过程中办法卵白的降解或变性，充分保证办法卵白的活性。由于秉承磁性分离，每次进行IP和Co-IP比拟于琼脂糖凝胶不错八成40%的时分。

本族具可选择多种洗脱体式：本族具字据抗体复合物中办法卵白的结构、生物学功能及后续运用的要求等，不错使用多种洗脱体式，包括酸性溶液、SDS-PAGE上样缓冲液或竞争性多肽等洗脱液进行洗脱。本族具用于GFP-Flag会通卵白的免疫千里淀界限参考图2。

图2. BeyoMag™ Protein A+G磁珠用于GFP-Flag会通卵白的免疫千里淀界限图。293T (东说念主胚肾细胞)转染GFP-Flag质粒36小时后，经Western及IP细胞裂解液(P0013)裂解。样品1为Input，即全细胞裂解液；样品2、3和4都为本Protein A+G磁珠免疫千里淀后的样品，其中样品2中使用的是普通的小鼠IgG (Normal Mouse IgG) (A7028)免疫千里淀后经SDS-PAGE卵白上样缓冲液(1X) (P0015A)洗脱后获取的样品，为阴性对照；样品3和4进行IP时使用的都是Flag抗体(AF519)，其中样品3使用SDS-PAGE卵白上样缓冲液(1X)洗脱，样品4使用3X Flag多肽(P9801)洗脱。使用SDS-PAGE卵白上样缓冲液(1X)洗脱后不错检测到Flag抗体的轻重链，而使用3X Flag多肽洗脱仅含有GFP-Flag，通盘泳说念仅检测到单一的办法条带。Western思路成像由BeyoImager™ 600化学发光成像系统完成(EI600)。实质界限会因本质条目、检测仪器等的不同而存在各别，图中数据仅供参考。

本族具使用方便。本族具储存在极端保护液中，不含甘油，不错通过磁性吸附扫尾快速高效的分离，无需离心操作。

金瓶梅电影

本族具的主要办法如下表：

Characteristics Description Product content 10mg/ml magnetic beads in specific protective buffer Beads size ~200nm Magnetization Superparamagnetic Coupled protein Recombinant Protein A and Protein G M.W. of protein ~25kDa (Protein A and Protein G) Antibody concentration ≥0.6mg Protein G per ml beads Binding capacity ≥ 0.7mg human IgG per ml beads Specificity Antibodies from many different species， including mouse， human， rabbit， cow， goat and sheep Elution method Elution with acid， competing peptide or SDS‐PAGE loading buffer Application IP， Co-IP， Protein purification 包装清单： 家具编号 家具称呼 包装 P2108-1ml BeyoMag™ Protein A+G磁珠 1ml P2108-5ml BeyoMag™ Protein A+G磁珠 5ml － 诠释书 1份 保存条目：

4℃保存，两年有用。经久不使用，不错-20℃保存，-20℃不错保存更永劫分。

珍重事项：

本族具经测试，反复冻融3次以上，不影响使用界限。

本族具需防守pH为6-8，幸免高速离心、干燥或冻存；请勿永劫分将磁珠置于磁场中，不然可能会引起磁珠聚团。

本族具使用前要适合充分重悬，即倒置多少次使磁珠夹杂均匀，混匀操作须慈祥，不宜剧烈涡旋轰动等，幸免卵白变性等。

在免疫千里淀或纯化时，提议设置阳性和阴性对照组。

卵白样品鸠合后宜尽快完成纯化使命，并应永远搁置在4℃或冰浴，以减缓卵白降解或变性。为有用扼制卵白降解，不错在卵白样品中添加适量的卵白酶扼制剂夹杂物，举例碧云天的P1005/P1006卵白酶扼制剂夹杂物(通用型)、P1048/P1049 卵白酶磷酸酶扼制剂夹杂物(通用型， 质谱兼容， 50X)、P1010/P1011 卵白酶扼制剂夹杂物(哺乳动物样品抽提用， 100X)、P1050/P1051 卵白酶磷酸酶扼制剂夹杂物(哺乳动物样品抽提用， 50X)等。

淌若使用真空泵等仪器吸取上清液，须珍重真空泵的吸液强度，以免吸力过大而吸取到勾通的磁珠。

酸性溶液洗脱时磁珠可能会发生勾通，属于普通风光，不影响磁珠的普通使用。0.1%的非离子型去垢剂(如Triton X-100、Tween-20或NP-40)可有用扎眼磁珠勾通，何况不会影响磁珠的抗体勾通遵守。

高浓度的DTT、巯基酒精、盐酸胍等对本族具与标签卵白的勾通可能有一定影响，但Western及IP细胞裂解液(P0013)、RIPA裂解液(P0013B/C/D)或NP-40裂解液(P0013F)等都皆备适用。碧云天坐蓐的不同裂解液的主要性情和各别，以及如何选择裂解液可参考咱们的关连网页：-buffer.htm。

本族具仅限于专科东说念主员的科学参谋用，不得用于临床会诊或诊治，不得用于食物或药品，不得存放于庸俗住宅内。

为了您的安全和健康高中生 自慰，请穿本质服并戴一次性手套操作。